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液相色譜儀過濾技巧
更新時間:2016-01-26   點擊次數:2761次

任何顆粒物(wu)進進液相色(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)后都(dou)會在柱(zhu)(zhu)(zhu)子進口端被篩板擋住,zui后的結果是將柱(zhu)(zhu)(zhu)子堵塞,表現出的特征是系統壓力(li)增加并(bing)使色(se)譜(pu)(pu)(pu)峰變形。因此,要采取各(ge)(ge)種預防 措施,包(bao)括操(cao)縱步驟和商品儀(yi)器自身的各(ge)(ge)種過濾設計,努力(li)防止或減少顆粒物(wu)進進液相色(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中,從而延長儀(yi)器和色(se)譜(pu)(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)(zhu)的使用(yong)壽命,并(bing)進步數(shu)據的可靠性。

在液相色譜儀中,顆粒物的主要來源有三個途徑:活動相、被測樣品和儀器系統部件的磨損物。
  
  1、被測樣品
  使用針筒式過濾器不可能100%得到通過過濾器的被測樣品,總會或多或少的丟失。丟失來自這樣幾方面:過濾器濾膜的吸附、過濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。  
  2、活動相
  
   無論是液相色譜儀HPLC級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統制備的水,zui后一步也是通過0.2μm微孔濾 膜。任何一種緩沖液中加進了固體物,必然活動相過濾將。少量雜質顆粒存在于活動相中必然成為殘渣。
  
  解決辦法:2. 1.活動相制備僅采用HPLC級液體時不需要過濾,反之所有活動相組成在使用前必須過濾。
  
  2.2在連接儲液瓶和泵的輸液管的末端進口采用下沉式過濾器(常見材質有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個過濾器的規格為≥10μm的微孔物質,所以它不能取代活動相過濾步驟,但是它能除往系統中的塵土并保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。
  2.3.推薦(jian)在(zai)HPLC系統中采用一(yi)個0.45 或0.5μm的(de)在(zai)線多孔過(guo)濾(lv)(lv)器(qi),接在(zai)自(zi)動進樣器(qi)和柱(zhu)子(zi)之間(jian),即使已使用了保護柱(zhu)。這個在(zai)線過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)將(jiang)成為(wei)擋(dang)板(ban)代替柱(zhu)頭(tou)的(de)濾(lv)(lv)板(ban),而且如采用一(yi)個玻璃砂芯濾(lv)(lv)板(ban), 既便宜,更換又方便(幾分(fen)鐘就(jiu)可更換)。若采用在(zai)線過(guo)濾(lv)(lv),液相色(se)譜儀(yi)檢(jian)測每(mei)批樣品開始前(qian)記錄(lu)下壓力值,當(dang)壓力上升一(yi)定值,例如25%或增加(jia) 500psi,應該更換玻璃砂芯濾(lv)(lv)板(ban)了,更換以后沖(chong)洗(xi)幾分(fen)鐘系統將(jiang)恢復到(dao)原來的(de)壓力值。


  3、儀器系統(tong)部件的磨損物
  
  zui后,在液相色譜儀HPLC系(xi)統中顆粒物的另一(yi)個主要來源是輸液泵(beng)(beng)密(mi)封墊和進樣(yang)閥(fa)旋(xuan)轉軸(zhou)的磨(mo)損。關于輸液泵(beng)(beng)密(mi)封墊的磨(mo)損更換有兩種不同(tong)建議。
  
3.1、在一般實驗室中輸(shu)液泵(beng)密(mi)封墊通常使用壽(shou)命為六個月到一年(nian),因此建議半年(nian)或一年(nian)更(geng)換(huan)這些密(mi)封墊。  
3.2、原裝密封(feng)墊的密封(feng)效果,更(geng)(geng)換以后輕(qing)易(yi)引起活(huo)動相(xiang)滲漏。所以,只(zhi)要(yao)不漏液就不要(yao)輕(qing)易(yi)更(geng)(geng)換密封(feng)墊。
  

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