色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性,延長柱子的使用壽命非常重要。因此對液相色譜柱的維護是關鍵。因為樣品中經常會含有能夠吸附在色譜柱固定相上的雜質化合物,所以應該經常對色譜柱進行清洗或沖洗。當色譜柱在多次進樣后顯示出柱效降低時,有必要采用適當的流動相對色譜柱進(jin)行處理(li),沖洗除去吸附在固(gu)定相上的污染物和(he)樣品殘余(yu)物。
方法如下:
1.將色譜柱從系統上取下,反向連接到輸液泵上。色譜柱出口不要連接到(dao)檢測 器(qi)上,以免污染檢測器(qi)流動池。
注意:大多數的硅膠基質色譜柱反相沖洗沒有問題,但是聚合物基質色譜柱并不能(neng)如此操作,在反相沖(chong)洗色譜(pu)柱(zhu)(zhu)之(zhi)前后與色譜(pu)柱(zhu)(zhu)生產商確認,反向沖(chong)洗流動(dong)相流速不要太(tai)大。
2.沖(chong)洗(xi)溶劑的(de)(de)(de)選擇要考慮分析(xi)的(de)(de)(de)樣品和(he)使(shi)用的(de)(de)(de)流動(dong)相(xiang)條件(jian),一般清洗(xi)流動(dong)相(xiang)強度(du)應該(gai)比流動(dong)相(xiang)更(geng)強,但是條件(jian)應該(gai)盡可能的(de)(de)(de)溫(wen)和(he)。
A. 用適當的溶劑沖洗色譜柱的鹽和強添加劑。
B. 用(yong)比(bi)分析流動相(xiang)更強的溶(rong)劑沖洗,該溶(rong)劑與(yu)流動相(xiang)組成相(xiang)同但不含鹽和酸。
C. 如果認為B沒能*清洗干凈色譜柱,用(yong)100%zui強溶劑沖洗。
在清洗色譜柱時,用與流動相組(zu)成相同的(de)溶劑,但是如果使用其他的(de)溶劑,重要的(de)是要考慮到溶劑之間的(de)互溶性,另外不(bu)要用強(qiang)酸和強(qiang)堿。
下圖是采用不同洗脫能力的流動相沖洗色譜柱時的色(se)(se)譜圖,可見色(se)(se)譜柱上的雜質逐漸(jian)被(bei)洗脫下來。